生物顯微鏡-干涉相襯顯微鏡結(jié)構(gòu)
諾馬斯基(Nomarski)微分干涉相襯顯微術(shù)(簡(jiǎn)稱干涉相襯)是20世紀(jì)50年代中期在光學(xué)顯微術(shù)內(nèi)出現(xiàn)的一個(gè)新分支,即偏振光的雙光束干涉。與其他雙光束干涉顯微術(shù)相比,主要區(qū)別是:這種顯微術(shù)參加干涉的兩文光束均通過(guò)物體,然后借某些方法再合成一束以產(chǎn)生干涉,而不是一支通過(guò)物體的光束和另一支不通過(guò)物體的所謂參考光束之間的干涉。
干涉相襯能將物體的光學(xué)厚度梯度如實(shí)地反映出來(lái),形成其他顯微術(shù)所沒(méi)有的三維立體浮雕圖像。
由于微分干涉相襯顯微術(shù)對(duì)標(biāo)本的適應(yīng)性較廣,無(wú)論標(biāo)本厚與薄,折射率相差是否大,染色與否,是否活體,等等,均能觀察,因此在組織胚胎、血液、神經(jīng)、微生物、生物、流體生物學(xué)及許多無(wú)機(jī)物的觀察上得到廣泛的應(yīng)用。
干涉相襯顯微鏡在結(jié)構(gòu)上除物鏡和聚光器外,其他結(jié)構(gòu)與一般生物顯微鏡相同。
聚光器類(lèi)似于位相顯微鏡的轉(zhuǎn)盤(pán)形式,但內(nèi)部安裝了各種倍率用的諾馬斯基棱鏡。使用不同物鏡時(shí),可以轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)盤(pán)以選擇相應(yīng)的棱鏡。
為了擴(kuò)大使用范圍,某些轉(zhuǎn)盤(pán)內(nèi)有明視場(chǎng)觀察用的空鏡孔。
物鏡有兩種設(shè)計(jì)形式。一是每種放大倍率的物鏡各配備一塊諾馬斯基棱鏡,裝配時(shí).棱鏡的相干像平面A’應(yīng)與物鏡像方焦面重合,如圖3—32所示。使用時(shí)只要借螺栓橫向移動(dòng)棱鏡以改變干涉色即可。這種設(shè)計(jì)像質(zhì)好,使用方便,但成本較高。另一種設(shè)計(jì)是所有物鏡均采用一塊諾馬斯基棱鏡。使用這種裝置時(shí),棱鏡在光軸方向和橫向位置均能調(diào)整。對(duì)萊一放大倍數(shù)的物鏡而言,先軸向調(diào)整棱鏡,使相干像面A’與該物鏡像方傷面重合,然后橫向移動(dòng)棱鏡改變干涉色以取得的觀察效果。這種設(shè)計(jì)成本較低,但使用則較為復(fù)雜。
諾馬斯基棱鏡的角很小(約十幾分),厚度為l一左右,其中一塊棱鏡的光軸與底面夾角約在8.5°,通常用石英制造。
干涉相襯顯微鏡中諾馬斯基微分干涉裝置原理圖中1為起偏器,2和8為諾馬斯基棱鏡,3為聚光鏡物方焦面(即干涉平面A).4為聚光鏡,5為物體,6為物鏡,7為物鏡像方焦面(即干涉平面A’).9為檢偏鏡,10為像平面??梢?jiàn)干涉平面A和A’均在諾馬斯基棱鏡2和8之處,滿足了高倍物鏡和聚光鏡的要求。
實(shí)際上,內(nèi)于棱鏡的膠合面是一斜面,致使其相應(yīng)的干涉平面也與系統(tǒng)的光軸成一角度,為使干涉平面與系統(tǒng)光軸垂直以便與物鏡(或聚光鏡)的焦面重合,必須將棱鏡相應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)一個(gè)角度方可。
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