熒光顯微鏡--顯微熒光分光光度計
顯微熒光分光光度計是一種在一定波長范圍內(nèi)測定熒光顯微物體所發(fā)射的熒光量的儀器,實質(zhì)上它是分光光度計與熒光顯微鏡的結(jié)合。它通過測量某些生物學(xué)結(jié)構(gòu)(例如膠原纖維、葉綠體等)的自發(fā)熒光或用熒光染料染色的某些生物學(xué)物質(zhì)的繼發(fā)熒光,從更至圭物至標(biāo)本進行定量分析。顯微熒光分光光度計與顯微分光光度計的差別僅僅是所使用的顯微鏡不同而已,關(guān)于熒光顯微鏡的構(gòu)造、原理及其使用已經(jīng)在第九章中作了詳細(xì)介紹,這里不再重復(fù)。
熒光顯微鏡--顯微熒光分光光度計同以光的吸收為基礎(chǔ)的顯微分光光度術(shù)相比較,顯微熒光光度術(shù)具有一些明顯的優(yōu)點。首先,當(dāng)背景足夠暗時,達個方法對于非常少量的熒光物質(zhì)是高度靈敏的、一般熒產(chǎn)法所至染料的zui低濃度比其他吸收法低1萬倍。第二,由于熒光物質(zhì)本身就是自發(fā)光物體,不管測闌內(nèi)物體的形狀是規(guī)則的還是不規(guī)則的,不管物質(zhì)分布是均勻的還是不均勻,出物體所輻射酌光量子將在光電倍增管上產(chǎn)生相同的效應(yīng),因此對于顯微英光光度木來說就避免了分布誤差。第三,使用這種方法操作比較簡便,測量迅速,特別適合于大量樣品的分析。因此,顯微熒光分光光度計已經(jīng)應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)的細(xì)胞化學(xué)和組織化學(xué)、熒光抗體技術(shù)和酶標(biāo)技術(shù)等廣泛的領(lǐng)域。同時,門描技術(shù)也已被
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