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生物顯微鏡-形態(tài)學(xué)測(cè)量指標(biāo)與方法

更新時(shí)間:2012-02-25   點(diǎn)擊次數(shù):2562次

生物顯微鏡-形態(tài)學(xué)測(cè)量指標(biāo)與方法

1.灰度(sreylevel>:指圖像各種顏色的深淺程度。目前的圖像分析儀可將灰度分為256級(jí),如免疫組織化學(xué)標(biāo)本的生物顯微鏡顯微圖像上反應(yīng)產(chǎn)物的染色深淺即可用灰度來(lái)表示,能將一張標(biāo)本上不同染色深度區(qū)分成為256級(jí),這是肉眼所不及的。因此,某些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,如果用光學(xué)顯微鏡作一般的觀察,似乎實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組無(wú)明顯差異,而用顯微圖像分析系統(tǒng)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,則可反映出顯著性差異,這說(shuō)明僅僅用顯微鏡觀察是不夠的。

由于免疫反應(yīng)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)不一定是均勻分布的,在同一個(gè)細(xì)胞中就可產(chǎn)生各種灰度,這種情況如何進(jìn)行比較?有兩種方法可供選用:一種方法是測(cè)每個(gè)細(xì)胞的平均灰度,另一種方法是在反應(yīng)產(chǎn)物不均勻的細(xì)胞中可用每一種灰度所占的百分率來(lái)表示。例如要觀察1000個(gè)細(xì)胞,在這些細(xì)胞中各種灰度所占的百分率可測(cè)出,并作出曲線,或用其他統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理,進(jìn)行比較。

有些生物顯微鏡顯微圖像分析系統(tǒng)中帶有光密度計(jì)組件,光密度計(jì)能將掃描器視頻信號(hào)變換成對(duì)應(yīng)數(shù)值,然后數(shù)值化,就能用光密度單位來(lái)校正。因此,光密度計(jì)把被測(cè)物的積分光密度作為主要輸出,所謂積分光密度即各個(gè)單獨(dú)探測(cè)的像素密度分布的總和。因?yàn)槿菀椎玫奖粶y(cè)物的面積,也就很容易求出平均密度。光密度在組織化學(xué)反應(yīng)的定量領(lǐng)域內(nèi)極為有用?;叶仁?mdash;•種相對(duì)值,而光密度是值。在文獻(xiàn)中光密度常用oD(opticaldensity)表示。

2.長(zhǎng)度:形狀不規(guī)則的線形組織結(jié)構(gòu),一般方法很難計(jì)算出其長(zhǎng)度,如組織中的毛細(xì)血管、神經(jīng)纖維、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中的各種膜性結(jié)構(gòu)等,以往常用排列稀疏或稠密等詞描述,顯微圖像分析系統(tǒng)則可測(cè)出各種圖像的周界線長(zhǎng)度。

3.面積:無(wú)論是在光鏡或電鏡下觀察的標(biāo)本,都要涉及有關(guān)標(biāo)本中某些結(jié)構(gòu)的面積問(wèn)題。即使是極不規(guī)則的結(jié)構(gòu),用生物顯微鏡顯微圖像分析系統(tǒng)也能算出其面積。在一定的放大倍數(shù)下,可以測(cè)出每2P“中含多少像素,因此畫(huà)出待測(cè)結(jié)構(gòu)的輪廓,在所勾畫(huà)的范圍內(nèi)含多少像素是立即可顯示出來(lái)的,這樣,很快可算出面積的數(shù)值。

 

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